诊断细菌感染最准确的方法是细菌培养，只要H.pylori培养成菌落后，可以用各种生化及分子生物方法进行菌落鉴定，其特异性可达100%。因此，用细菌培养方法检测H.pylori常作为诊断H.pylori感染的“金标准”。然而用培养的方法检测H.pylori作为常规诊断H.pylori的检测手段临床应用较少，临床上H.pylori培养的方法主要用于体外检测抗生素的敏感性以指导临床用药，还可作为“金标准”评价新的诊断方法。事实上，H.pylori的细菌培养主要用于科研方面，如H.pylori的分型，构建动物模型，以及H.pylori的致病机制研究。经胃镜活检钳取胃黏膜组织用于培养时，应无菌操作；通常由胃窦部取材，对服用抑酸剂特别是质子泵抑制剂者，应增加胃体部组织1块。

H.pylori的培养包括固体培养和液体培养。固体培养基包括含抗生素的选择性培养基和不含抗生素的非选择性培养基；液体培养基为布氏肉汤或脑心浸液。H.pylori的生长条件为37℃，微需氧。细菌培养后应依据菌落形态、涂片染色的细菌形态以及细菌的生化反应常规进行鉴定。培养阳性的H.pylori菌落呈半透明针尖样（直径1-2 mm）（图4-2右）；培养物涂片Gram染色呈Gram阴性短棒状、S状弯曲菌（图4-2左）；通常应同步进行的生化反应为尿素酶、过氧化氢酶和氧化酶检测；如需进行进一步的体外药敏试验或其他研究，需转种增菌并冻存菌液。